表面等離子共振顯微鏡簡單介紹：
可以同時得到細胞原位明場成像、SPR成像、及SPR動力學曲線定量親和常數(shù)、結合解離常數(shù)，它為免標記研究分子相互作用的領域開辟一個嶄新的前沿。專門針對細胞膜蛋白和相關分子免標記檢測而設計的SPRm200， 使您在不需要從細胞中提取和分離膜蛋白的前提下實時觀察細胞結構并同時測量藥物和靶點在細胞上的結合過程。還可進行對藥物和在天然狀態(tài)下的膜蛋白之間相互作用的測量，高分辨SPR成像，可以同時實現(xiàn)單個或多個細胞的研究，從而實現(xiàn)細胞與藥物結合的異質(zhì)性及統(tǒng)計學分析。由于出色的靈敏度和穩(wěn)定性，SPRm200能夠測量納米尺度上的結合行為，可用于研究細菌或病毒與抗菌性藥物的相互作用，以及發(fā)展新型藥物載遞納米顆粒。

（1）小分子藥物（<200Da）與單細胞結合篩選與分析

（2）小分子藥物（<200Da）與多細胞/活細胞結合篩選與單個細胞精度統(tǒng)計學分布分析，研究細胞異質(zhì)性差異

（3）抗體藥物與單個/多個活細胞結合篩選與單個細胞精度統(tǒng)計學分布分析，研究細胞異質(zhì)性差異

（4）細菌或病毒與抗菌性藥物的相互作用

（5）其他分子細胞/活細胞層面原位研究

表面等離子共振顯微鏡主要功能：

實時定量活細胞分子相互作用

單個細胞/多個細胞動力學&定量分析（Ka，Kd，KD，C）及統(tǒng)計分布

明場成像、SPR成像結合單點動力學分析

生物標記檢測, 藥物靶向研發(fā)

小分子免標分析（<200Da）

電化學同步分析

小分子、DNA、抗體、肽段、蛋白、病毒、細菌、細胞

技術特點：

細胞原位：真正實現(xiàn)細胞層面的原位分子互作，無需提純，可以直接原位分析藥物在細胞層面與分子互作，尤其為膜蛋白受體（糖蛋白、GPCR）等提供了研究解決方案；

通量：SPR視場600um*600um，可以同時進行多個細胞與分子互作的研究，從而實現(xiàn)藥物統(tǒng)計學分析，和細胞異質(zhì)性研究；

精度：良好靈敏度，可以實現(xiàn)<200Da 小分子藥物與細胞的互作研究；

高分辨動態(tài)可視化：可以動態(tài)可視化觀察藥物分子與細胞反應的全過程及成像，同時可以得到定量的SPR分析曲線，從而得到定量Ka，Kd ，KD。高分辨率，1um SPR成像分辨，從而可以得到單個細胞的分辨成像與定量數(shù)據(jù)。

 技術能力：

基于原位細胞分子互作的研究

小分子藥物

常用藥物中，小分子藥物可占總量98%，小分子藥物通常是信號傳導抑制劑，它能夠特異性地阻斷腫瘤生長、增殖過程中所必需的信號傳導通路，從而達到治療的目的。多通過濃度梯度提供動力被吸收。

1. 小分子藥物與HEK 293細胞GPR39受體相互作用

圖（a）SPR成像，亮暗反映不同細胞、不同區(qū)域的結合作用的強弱；圖（b），明場成像，可以得到不同細胞的觀察與選區(qū)；圖（C）多個興趣選區(qū)，每個區(qū)域的SPR信號曲線，圖（e、f、g）分別為多個興趣選區(qū)，親和常數(shù)/解離常數(shù)/結合常數(shù)的統(tǒng)計分布：KD：413nM（42nM標準偏差），kd = 4.27E-3 s-1  (0.720E-3 標準偏差)，ka = 6.92E3 M-1 s-1  (0.721E3 標準偏差)

2. 小分子藥物與細胞ASIC 酸敏感離子通道受體相互作用研究

抗體藥物

單克隆抗體（mAb）療法已成為治療癌癥、自身免疫性疾病、哮喘和許多其他疾病的既定方法。單克隆抗體（mAb）藥物占整個生物制藥50%的份額，其中超過60%都是膜蛋白受體。SPRm200可以在單細胞層面定量研究單克隆抗體（mAb）和膜蛋白結合作用。傳統(tǒng)SPR是直接將純化的蛋白固定在芯片表面，對于膜蛋白而言是有問題的，膜蛋白從細胞環(huán)境中提取并保持自身形態(tài)非常困難。

基于病毒、細菌載體分子互作的研究

1.快速ASTs實驗：抗生素與大腸桿菌（Live E.Coli O157.H7）代謝活性研究

ASTs實驗是確定抗生素易感性和細菌菌株耐藥性的重要實驗。目前大多數(shù)AST實驗是基于細胞培養(yǎng)，需要幾天時間才能完成?？焖貯ST檢測可以降低發(fā)病率死亡率和幫助制定早期窄譜抗生素治療方案。通過SPRm200，我們使用等離子成像和PIT技術跟蹤單個細菌細胞的運動。監(jiān)測隨著細胞代謝和抗生素的投入的Z向變化?？梢钥吹?，抗生素可以明顯減弱細菌細胞的活動，并且可以定量計算，從而成為快速AST檢測方法。

2. 基于SPRm200，病毒載體微陣列研究多種不同GPCR受體與配體的相互作用的研究

SPRM電化學阻抗方法定量檢測分子互作

通過電化學SPRM阻抗分析，測量了傳感器表面病毒肽配體和不同GPCR受體的結合動力學常數(shù)。

相關文獻（部分）

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